sábado, 11 de octubre de 2014

Rosa de Bengala

INTRODUCCIÓN:
Se utiliza un antígeno de Brucella abortus biotipo teñido con Rosa de Bengala a un pH de 3.65 +/- 0.05 para la detección de aglutininas especificas de Brucella. Esta prueba puede ser utilizada para un diagnostico temprano.


MATERIAL:
Antígeno Rosa de Bengala
Placa de prueba
Pipetas  desechables
El gotero incluido proporciona una gota de 30-40 ul.
Cronometro
Muestra.

PROCEDIMIENTO:
1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo controles y muestras del suero.
2. Utilizando la pipeta automática adiciones 30ul de la muestra del paciente e un circulo de la placa.
3. Mezcle suavemente en Antígeno de Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo después coloque 30ul en la placa de prueba en el mismo circulo donde se coloco la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador( usar un aplicador diferente para cada muestra de paciente y controles.
4. Agitar la placa con movimiento rotatorios por 4 minutos.
5. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado.

RESULTADO:
 
Negativo

CONCLUSIÓN:
 
Es un práctica bastante sencilla y rápida de realizar y muy útil para detectar la Brucella de manera fácil





Tiempo de Sangrado

MÉTODO DE DUKE

OBJETIVO
Que al termino de la practica realice el tiempo de sangrado por cualquier de los dos métodos existentes.
INTRODUCCIÓN
Un tiempo de sangrado normal indica una retracción normal de los capilares y la existencia de un numero suficiente de plaquetas, con actividad normal.
La metamorfosis viscosa normal depende de un buen mecanismo extrinseco de producción de tromboplastina, por lo tanto, el tiempo de sangrado se alarga en la insuficiencia del factor  Vll. El tiempo de sangrado aumenta en forma caracteristica en la purpura  trombocitopenica.
MATERIAL
Lanceta estéril 
Torundas alcoholadas 
Reloj cronometro
Papel filtro

TÉCNICA
1.- Con una lanceta estéril, se practica en el borde inferior del lóbulo de la oreja una punción de 3mm. de profundidad. Se pone en marca el cronometro. El borde debe ser profundo, y no debe de abarcar venas visibles.
2.- A intervalos de medio minuto, se aplica cuidadosamente, sobre la gota de sangre el borde de un pequeño papel filtro, cuidando de no tocar la piel. Esta maniobra por objeto es impedir que se forme coagule la gota de sangre sobre la herida ,pues los tiempos de sangrado resultaran anormalmente bajos.
3.- Utilizando una nueva zona de papel filtro para cada secado de medio minuto, puede tener un registro conveniente del tiempo total (tiempo en minutos = numero de gotas divididas entre dos ) se toma como punto final al momento en el cual el papel filtro ya no absorbe sangre.

TIEMPO DE SANGRADO NORMAL CON EL MÉTODO DE DUKE:
De uno a tres minutos (si embargo, puedo ser a veces hasta cinco minutos en sujetos normales).
RESULTADO:
Método de DUKE 1:33 minutos.
EVIDENCIA:

MÉTODO DE IVY
TÉCNICA: 
1. Se coloca alrededor del brazo un manguito de esfindonometro con el cual se ejerce precio de 40 mm. De Hg. Que debe permanecer aquel durante toda la prueba.
2. Utilizando una lanceta estéril se hace a intervalos de cortos tres punciones (entre 2.5 y 3.0 mm de profundidad), a lo  largo de la cara flexora (interna) el antebrazo, evitando las venas visibles. Se pone en marcha el cronometro.
3.- A intervalos  de medio minuto , utilizando papel filtro se seca cuidadosamente cada gota de sangre en la misma forma que para el método  de DUKE, el punto final es el mismo.

TIEMPO NORMAL DE SANGRADO EN EL MÉTODO DE IVY.
ENTRE 2 Y 6 minutos (máximo de 7 minutos).
NOTA: el tiempo de sangrado representa sencilla y útil (aunque algo imprecisa) de la eficacia de las funciones capilares y de plaquetas  en la hemostasia. Es preferible el método de IVY al de DUKE,pues las condiciones son mas contantes y se realizan en realidad 3 pruebas.
RESULTADO:
Método de IVY 3:48 minutos.
CONCLUSIÓN:
Es una práctica bastante sencilla de realizar, aunque en el metodo de Ivy nos constó un poco de trabajo mantener la presión estable, sin embargo pudimos realizarla con éxito




sábado, 4 de octubre de 2014

VDRL


Treponema pallidum, la bacteria que causa la sífilis, una enfermedad que generalmente se transmite por vía sexual.
Su diagnóstico puede ser serológico, con lo que se pueden determinar dos clases de anticuerpos:
1.    Tipo “cardiolipina”.- No treponema e inespecíficos
2.    Antitreponemas específicos
La prueba realizada Venereal Disease Research Laboratory VDRL se le conoce como una prueba para sífilis no-treponémica. Es parte de la exploración inicial de la sífilis e iniciar un tratamiento. Con  el método cualitativo empleando la  placa presenta floculación, si se presenta el caso se lleva a cabo el método cuantitativo con el o los sueros positivos.
También se emplea en el cuidado prenatal del embarazo, así como parte de los estudios de laboratorio prenatales.

MATERIAL:


o    Placa cóncava
o    Puntillas
o    Aguja No. 21 sin bisel
o    Cronómetro
o    Pipeta semiautomática
o    Microscopio
o    Antígeno VDRL y los Sueros de Controles (almacenados 2-8°C)


1. Depositar 0.05 ml. de suero problema en un anillo de la placa cóncava.
2. En otro anillo colocar una gota de suero control positivo y en el anillo siguiente una gota
de suero control negativo, extendiendo dentro de los mismos.
3. Añadir una gota del antígeno en suspensión previamente resuspendido en cada muestra
con la aguja N.21
4. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm durante 4 min.
Las pruebas que se realizan en un clima extremadamente seco pueden evaporarse, por lo tanto
la paca se cubre con la tapa de una caja Petri humedecida.






Si el examen es positivo, el siguiente paso es confirmar los resultados con examen FTA-ABS, que es un examen más específico para la sífilis.
La capacidad del examen VDRL para detectar sífilis depende de la etapa de la enfermedad. La sensibilidad del examen para detectar la sífilis se acerca al 100% durante las etapas intermedias y es menos sensible durante las etapas más tempranas y tardías.
Las siguientes afecciones pueden provocar un examen falso positivo:
·  VIH
·  Enfermedad de Lyme
·  Ciertos tipos de neumonía
·  Malaria
·  Lupus eritematoso sistémico

Si las pruebas hubieran resultado positivas, se aplicaría el siguiente método

Método cuantitativo

1. Seleccionar los sueros positivos obtenidos en la prueba cualitativa.
2. Colocar en una gradilla 6 tubos y numerarlos.
3. Agregar a cada uno 0.5 ml. de solución salina al 9%.
4. Depositar 0.5 ml. de suero al tubo 1 y mezclar.
5. Pasar 0.5 ml. del tubo 1 al tubo 2 mezclar.
6. Pasar 0.5 ml. del tubo 2 al tubo 3 mezclar
7. Continuar con este proceso hasta el tubo 6.
8. Depositar 0.05 ml. de cada una de las diluciones sobre los diferentes anillos de la placa
cóncava.
9. Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado (VDRL) utilizando la aguja No.21 sin
bisel a cada dilución.
10. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm. Durante 4 min.
11. Leer al microscopio con objetivo seco débil 10x.
Resultados e interpretación
El título del suero problema será la última dilución que presente un resultado positivo. Ejemplo:
Si se presenta floculación hasta el tubo 3 – dilución 1:8, por lo tanto el título será 1:8.
Nota:
1.Sueros extremadamente turbios o hemolizados son insatisfactorios para la prueba.
2. Sueros débiles positivos y fuertes evidencias clínicas de la enfermedad es conveniente 
efectuar la prueba cuantitativa, ya que ocasionalmente pueden presentar el fenómeno de 
prozona.
3. Si la lectura del resultado no se realiza inmediatamente después de los 4 min. Puede secarse
la reacción y dificultad en la interpretación.
4. El antígeno en suspensión debe estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.

Conclusiones
Esta prueba cualitativa VDRL nos permite identificar a los pacientes con sífilis, enfermedad producida por la bacteria Treponema pallidum; se trata de una prueba rápida y certera que permite el inicio de un tratamiento eficaz evitando que avance y pueda ser controlada satisfactoriamente. En este caso, los resultados fueron negativos en ambas pruebas, por lo cual no hubo necesidad de utilizar el método cuntitativo.





sábado, 13 de septiembre de 2014

GRUPO SANGUINEO

GRUPO SANGUINEO

Objetivo:

El alumno determinara el grupo sanguíneo y el factor Rh de una muestra sanguínea utilizando los antisueros correspondientes y previa demostración correctamente.

Introducción:

Los grupos sanguíneos se han clasificado así por poseer características diferentes, estas características son los antígenos (aglutinogenos) y los anticuerpos (aglutininas) que son los responsables de las reacciones adversas inmunológicas en las transfusiones.

Material: 

  • Equipo de venopunción.
  • Placa de vidrio excavada. 
  • Aplicadores de madera.
  • Lanceta estéril.
  • 4 Tubos de ensaye (por muestra de sangre).
  • Gradilla.
  • Centrifuga.

Reactivos:

  • Anti-suero A
  • Anti-suero B
  • Anti-suero D
  • Solución isotónica de NaCl al 0.9%

Método en placa excavada:

  1. Se utiliza punción cutánea con la lanceta, se deshecha la primera gota y se deposita una gota en cada una de las excavaciones en forma horizontal o se marcan las letras A, B y Rh, y posteriormente se añade una gota de suero en donde le corresponda.
  2. Mezclar perfectamente con un aplicador diferente cada una de las preparaciones.
  3. Leer el resultado.

Método en tubo de ensaye:

  1. Se utiliza la punción venosa, se deposita 2 ml de sangre en un tubo de ensaye con 9.8 ml de solución isotónica de NaCl al 0.9%, para formar una suspensión de eritrocitos al 2%.
  2.  Marcar 3 tubos de ensaye con las letras A,B y Rh y depositar el suero que le corresponde.
  3. Añadir a los tubos una suspensión de eritrocitos al 2%.
  4. Centrifugar a 1000 r.p.m. durante 1 minuto.
  5. Sacar los tubos e inmediatamente ver si existe aglutinación.

Resultados:

Método en Placa excavada. "A" Rh Positivo.
Método en Tubo. "A" Rh Positivo.

Conclusión:

Es una práctica bastante sencilla y rápida de realizar pero de suma importancia, ya que es información vital que todo ser humano debería de saber y tener presente en caso de alguna emergencia de transfusión sanguínea.